10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2008.04.013
绿色荧光蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞及向神经细胞的分化
目的 建立能够稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠胚胎干细胞(ESC),并诱导其向神经细胞分化,为临床移植治疗神经系统疾病提供方便追踪观察的神经细胞.方法 分别用脂质体、电穿孔转染法转染小鼠胚胎干细胞系R1,检测48 h转染效率;经G418筛选后,得到稳定高效表达GFP的ESC克隆,通过碱性磷酸酶(AKP)染色检测ESC的生物学特性;利用单层分化法诱导转染GFP的胚胎干细胞向神经细胞分化,通过免疫荧光检测神经细胞特异标记Toil.结果 转染48 h的GFP阳性细胞转染率脂质体组为65%,电穿孔组为79%,两组比较差异无统计学意义(X2=3.14,P0.05).转染GFP的胚胎干细胞AKP染色阳性,并可诱导分化为Tuj1阳性的神经细胞.结论 建立稳定表达GFP基因的胚胎干细胞克隆,获得的转染GFP的胚胎干细胞能够分化为神经细胞.
胚胎干细胞、绿色荧光蛋白类、电穿孔、细胞分化
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R3(基础医学)
国家自然科学基金3D671025;国家科技攻关项目2004DA754C;黑龙江省教育厅海外学人科研合作基金1151112031;黑龙江省教育厅科学技术研究项目11531146
2008-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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