HPV16地方分离株E6基因的克隆与原核表达研究

摘要：

目的 克隆人乳头瘤病毒(HPV16E6)基因并在大肠埃希菌中表达,对表达产物进行鉴定.方法 用PCR方法从克隆质粒pUC19-HPV16E6E7中扩增HPV16E6基因,采用定向克隆构建pQE30-HPV16E6原核表达质粒,利用酶切和序列测定鉴定重组质粒.将pQE30-HPV16E6转化大肠埃希菌BL21(DE3),建立重组工程菌pQE30-HPV16E6/BL21(DE3).经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,利用Western blot鉴定抗原特异性.结果 PCR产物470 bp,重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确.SDS-PAGE分析在18×103处有蛋白条带出现,与预期一致.Western blot分析证实目的条带与HPV16E6抗体有特异性反应.结论 成功构建了HPV16E6基因的基因工程菌株,能高效表达E6蛋白,表达蛋白具有良好的免疫反应性.

关键词：乳头瘤病毒、人、基因表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：黑龙江省科技攻关项目CB02C111;黑龙江省哈尔滨市科技攻关项目2004AA3CS176-1

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：280-282