10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2006.05.005
诱导小鼠淋巴细胞表达γ-干扰素的血吸虫成虫可溶性抗原组分
目的 分离纯化日本血吸虫成虫可溶性抗原(soluble adult worm antigens,SAWA)各个组分,并分别鉴定其诱导小鼠脾淋巴细胞表达γ-干扰素(IFN-γ)的能力.方法 常规制备血吸虫SAWA,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)层析法分离、收集并透析纯化各抗原组分,SDS-PAGE检测分析其含量及相对分子质量(Mr).常规制备感染42 d小鼠脾淋巴细胞悬液,设立PBS阴性对照组及各组分抗原实验组,分别刺激体外培养的感染小鼠脾淋巴细胞,诱生IFN-γ,用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组IFN-γ水平,筛选出能诱导IFN-γ高表达的抗原组分.结果 获得20种Mr不同且含量较高的SAWA组分抗原,Mr(×103)分别为22、23、24、28、40、45、56、62、64、65、68、70、71、74、78、91、95、102、102、105,其电泳图谱均显示为清晰的单一带.各组分抗原均能不同程度地诱导IFN-γ表达,其中Mr(×103)为22、24、45、62、64、65的组分抗原诱导IFN-γ的表达量较高,尤其是62×103组分抗原诱导表达IFN-γ水平显著高于其他实验组(P<0.01).结论 电泳层析法能很好地将日本血吸虫成虫可溶性抗原分成多个组分:62×103组分抗原具有诱导小鼠脾淋巴细胞高表达IFN-γ的能力,推测它可能是一个很强的Th1型淋巴细胞活性诱导分子.
血吸虫、日本、抗原、电泳、聚丙烯酰胺凝胶、干扰素Ⅱ型
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R5(内科学)
国家自然科学基金30471509
2006-10-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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