雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选

摘要：

目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度.方法 灌注法获取28 d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体.将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用.切下雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,调整细胞数为1×109/L后,将卵黄细胞接种于小盖玻片上,RPMI-1640含20%小牛血清培养,根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组(0、10、50、100、150、200 mg/L组).培养第7天,以核仁组织区相关嗜银蛋白(argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins,AgNORs)及乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase,LDH)为评价指标,对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色,Olympus-BH2显微镜观察,输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值.结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加,培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深,至100 mg/L时最深,随后又逐渐变浅.图像分析显示,雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组(q10=14.2189、q50=18.3358、q100=35.6491、q150=13.1849、q200=13.8604,P＜0.01;q10=10.3377、q50=11.7532、q100=23.1883、q150=10.2792、q200=9.3052,P＜0.01).雄虫抽提物100 mg/L组与其他各组比较,AgNORs及LDH明显升高(q10=21.4302、q50=17.3132、q150=22.4642、q200=21.7887,P＜0.01;q10=12.8506、q50=11.4351、q150=12.8896、q200=13.8831,P＜0.01).结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性,其作用的最适质量浓度为100 mg/L.

关键词：雄虫抽提物、血吸虫、日本、卵黄细胞、核仁组织区相关嗜银蛋白、乳酸脱氢酶

所属期刊栏目：25

分类号：R5(内科学)

资助基金：国家自然科学基金30570243;湖北省卫生厅科研项目JX1B067;武汉大学校科研和教改项目20030515

在线出版日期：2006-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：482-486