10.7499/j.issn.1008-8830.2019.09.017
干扰素 α 对乙型肝炎病毒X蛋白诱导小鼠足细胞系凋亡的影响及分子机制研究
目的 观察干扰素 α(INF-α)对乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响及其分子机制.方法 以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平.将MPC5细胞分为对照组:正常条件下培养的MPC5细胞;INF-α 组:正常MPC5细胞与INF-α 共培养;HBx组:HBx诱导的MPC5细胞;HBx+INF-α 组:HBx诱导的MPC5细胞与INF-α 共培养.不同实验条件下干预48 h后,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测足细胞裂孔隔膜相关蛋白(nephrin、CD2AP、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的mRNA及其蛋白的表达.结果 pEX-HBx转染MPC5细胞后48 h HBx mRNA表达最高(P<0.05).HBx组MPC5细胞凋亡率显著高于对照组、INF-α 组和HBx+INF-α 组(P<0.05).与对照组和INF-α 组相比,HBx组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显降低,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显增高(P<0.05).与HBx组相比,HBx+INF-α 组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显增高,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显降低(P<0.05).结论 INF-α 可抑制HBx诱导的MPC5细胞凋亡,其机制可能与INF-α 可调节HBx诱导的足细胞裂孔隔膜相关蛋白(CD2AP、nephrin、synaptopodin)和细胞骨架相关蛋白(TRPC6)的异常表达恢复正常有关.
干扰素α、乙肝病毒X蛋白、细胞凋亡、足细胞系、小鼠
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国家自然科学基金81760133;甘肃省国际科技合作专项18YF1WA040;甘肃省自然科学基金1606RJ2A107;甘肃省人民医院院内科研基金17GSSY1-1,18GSSY3-4
2019-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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