10.7499/j.issn.1008-8830.2017.01.018
肺炎链球菌诱导SPLUNC1表达及白藜芦醇对SPLUNC1表达的影响
目的:探讨肺炎链球菌(SP)感染时短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的宿主防御作用,及白藜芦醇(Res)对SPLUNC1表达的影响,为SP感染性疾病的治疗提供新的思路。方法根据感染复数(MOI)不同将SP感染BEAS-2B细胞分为对照组、MOI20 SP组和MOI50 SP组;根据Res药物浓度不同将Res预处理MOI20 SP感染BEAS-2B细胞分为12.5Res+SP组、25Res+SP组、50Res+SP组(Res终浓度分别为12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)。通过CCK-8法检测细胞活性,并选出SP、Res最佳作用浓度及时间。正式实验分为对照组、Res组、SP组和Res+SP组,采用实时定量PCR法和ELISA法检测各组SPLUNC1 mRNA及蛋白表达。结果随SP感染时间延长,细胞活性呈降低趋势;与对照组和MOI20 SP组相比,MOI50 SP组细胞活性有下降趋势;与MOI20 SP组相比,25Res+SP组细胞活性增强(P<0.05),50Res+SP组细胞活性降低(P<0.05)。以MOI20 SP菌悬液和25μmol/L Res进行正式实验。SP组和Res+SP组随感染时间延长,BEAS-2B细胞SPLUNC1 mRNA水平表达先增高,后降低(P<0.05);与SP组相比,各时间点Res+SP组SPLUNC1 mRNA及蛋白表达水平均增高(P<0.05);与对照组相比,仅Res组SPLUNC1 mRNA及蛋白表达水平随时间延长未见明显改变(P>0.05)。结论 SP感染可以诱导SPLUNC1表达,发挥宿主防御作用,Res可以在感染发生时上调SPLUNC1的表达,以浓度及时间依赖的方式加强细胞保护。
短腭、肺及鼻咽上皮克隆1、白藜芦醇、肺炎链球菌、人支气管上皮细胞
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R73;R5
浙江省自然科学基金资助项目LZ13H010001;浙江省教育厅项目Y201432837;卫生部国家临床重点专科开放课题20130209;温州市2014公益性科技计划项目Y20140668。
2017-03-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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