蟾蜍灵通过调节细胞间隙连接通讯抑制PDGF-BB诱导的系膜细胞增殖
目的 探讨细胞间隙连接通讯(GJIC)在蟾蜍灵抑制肾小球系膜细胞(MC)增殖中的作用及可能的机制.方法 以体外培养的系膜细胞为研究对象,血小板衍生生长因子(PDGF-BB)诱导系膜细胞增殖,蟾蜍灵干预.MTT法测定细胞增殖,Lucifer Yellow划痕标记染料示踪技术(SLDT)观察GJIC的改变,RT-PCR法测定间隙连接蛋白(Cx) 43、45、40基因在转录水平的改变情况,激光共聚焦显微术结合Fura-3染色法测定细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度.结果 MTT结果显示蟾蜍灵能够抑制PDGF-BB引起的系膜细胞增殖(P<0.01).与正常组相比,PDGF-BB刺激组GJIC受到抑制,Cx45和Cx40 mRNA显著上调(P<0.01),而Cx43 mRNA无明显变化(P>0.05),同时伴有细胞[Ca2+]i浓度升高(P<0.01);蟾蜍灵干预则可改善PDGF-BB引起的GJIC的抑制,下调PDGF-BB引起的Cx45和Cx40 mRNA的表达(P<0 01),同时降低细胞[Ca2+]i浓度(P<0 01).结论 蟾蜍灵可能通过从转录水平调节系膜细胞Cx45和Cx40的表达,降低细胞[Ca2+]i浓度,改善GJIC从而抑制系膜细胞增殖.
间隙连接、蟾蜍灵、细胞交流、PDGF-BB、系膜细胞
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R-33(医学研究方法)
南京医科大学科技发展基金重点项目2011NJMU251;南京市医学科技发展项目QYK11226
2013-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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