运用PCR-DGGE技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的初步研究

摘要：

目的 运用多聚酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏患者及基因携带者基因变异,探讨其对该病的诊断和研究价值.方法 提取G-6-PD缺乏症患者及其家系(患者父亲和/或母亲等)的外周血RNA,逆转录合成cDNA后,选取第11至12外显子部分cDNA片段进行PCR-DGGE,观察其电泳行为,将电泳行为异常的标本进行基因测序,最后做出基因诊断.结果 36个家系中33个家系发现G-6-PD基因在1304至1520片段出现PCR-DGGE多种异常电泳区带.9例母亲G-6-PD/6-PGD比值低于1.00,其中3例比值低于0.50,而且PCR-DGGE电泳行为一致,基因测序发现为双重杂合子;比值正常的G-6-PD缺乏基因携带者母亲均为单杂合子.该片段基因测序发现3个突变位点分别为:C1311T,G1376T,G1388A.各基因突变的位点有其特殊的电泳行为.结论 PCR-DGGE技术是一种敏感性高、可靠性强的筛查基因突变的方法.在临床研究G-6-PD缺乏,特别是常规诊断技术不能发现的女性G-6-PD缺乏基因携带者的检测中具有很强的应用价值.

关键词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏、变性梯度凝胶电泳、基因测序、突变

所属期刊栏目：9

分类号：R556.6(血液及淋巴系疾病)

资助基金：广东省深圳市科技计划200601004

在线出版日期：2008-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：529-532