10.3969/j.issn.1008-8830.2002.06.012
人肺表面活性相关蛋白A1在甲醇酵母的胞内表达
目的研究人肺表面活性相关蛋白A1(SP-A1)在甲醇酵母中的胞内表达.方法将编码正常人肺表面活性相关蛋白A1基因的cDNA克隆至甲醇酵母的胞内,表达载体pPIC3.5K,构建了重组质粒pPIC3.5K/SPA1,电穿孔方法转化至酵母宿主菌GS115和KM71,用PCR方法筛选阳性转化子,并用斑点印迹法、G418方法筛选多拷贝转化子,经甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹法鉴定表达产物.结果SP-A1基因在甲醇酵母中成功的表达了蛋白质,SDS-PAGE分析证实目的蛋白分子量为32kD,可被SP-A多克隆抗体特异识别.结论人组织特异SP-A1蛋白可在甲醇酵母中高效表达,表达产物具有免疫源性.
人肺表面活性相关蛋白A1、甲醇酵母、表达
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Q785(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金36970770;广东省自然科学基金950558
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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