超声联合生物纳米泡介导基因编辑的实验研究

摘要：

目的 探讨超声联合生物纳米泡在体外介导基因编辑的可行性.方法 提取生物纳米泡(GVNPs),用阳离子聚合物PEI修饰其表面,再与载有向导RNA(sgRNA)的质粒共孵育构建GVNPs-PEI-DNA(GVPD)转染复合物,通过转染sgRNA进入稳定表达Cas9蛋白的细胞系的方式,介导基因编辑.实验分为空白组(Blank组)、单纯GVPD转染组(-US组)和超声联合GVPD转染组(+US组).流式细胞仪评估转染效率,CCK-8检测细胞增殖活性,流式分选结合有限稀释法筛选阳性单克隆,T7EI酶切和Sanger测序法进行鉴定.结果 超声联合GVPD组的转染效率较其他组显著增加,递送后各组细胞活力未发现显著改变,阳性单克隆的T7EI酶切和测序结果都显示出有效的基因编辑.结论 超声联合生物纳米泡可以介导基因编辑,为CRISPR/Cas9系统提供了一种新的非病毒载体递送方式.

关键词：超声;生物纳米泡;CRISPR/Cas9;基因递送

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资助基金：国家自然科学基金No.81871376.No.82071935

在线出版日期：2021-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：925-928