10.3969/j.issn.1002-0101.2012.09.001
超声联合微泡介导神经营养因子-3基因转染神经干细胞实验研究
目的 探讨体外利用超声联合微泡介导神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞的有效性和适宜超声参数.方法 体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200 μl微泡(3×108/ml)和20μl pEGFP-NT-3基因重组质粒(1μg/μl),再加入500μl神经干细胞悬液(5×105/ml),在不同的超声条件下(声强分别为1、1.5、2 W/cm2,照射时间分别为30、60、90、120、150 s),用1 MHz非聚焦探头辐照上述混合液,转染后在荧光显微镜下观察重组质粒转染效率,锥虫蓝染色检测神经干细胞活性.空白对照组为无超声辐照的质粒与神经干细胞的混合物.结果 (1)转染48 h后绿色荧光表达最强;(2)声强1.5 W/cm2、照射时间60 s为本实验适宜的超声条件,此时神经干细胞基因转染率最高,且细胞活性较高.结论 超声联合微泡介导NT 3基因转染神经干细胞具有可行性,为神经干细胞基因转染提供了新方法.
超声、微泡、神经营养因子-3、神经干细胞、基因转染
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O62;R97
深圳市科技计划重点项目200901014
2013-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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