CD38经TFEB介导促进溶酶体再生而调节巨噬细胞胆固醇外流

摘要：

目的:探讨CD38对巨噬细胞溶酶体再生及胆固醇外流的影响.方法:以低密度脂蛋白(LDL)受体敲除(LDLr-/-)小鼠的骨髓源性巨噬细胞为细胞模型.采用活细胞成像系统观察烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)对巨噬细胞溶酶体数量的影响;利用ELISA检测巨噬细胞内NAADP的水平;细胞经NA处理后,利用RT-qPCR检测CD38 mRNA表达,利用Western blot检测CD38蛋白表达和转录因子EB(TFEB)磷酸化水平;利用激光共聚焦技术观察CD38/NAADP信号通路对溶酶体数量和胆固醇外流的影响.结果:NAADP可显著增加巨噬细胞中溶酶体的数量(P<0.05),这种效应可被NAADP拮抗剂NED-19、Ca2+螯合剂BAPTA及钙调磷酸酶抑制剂CsA明显抑制(P<0.05);CD38可明显促进巨噬细胞中NAADP的合成(P<0.05);NAADP合成底物NA可明显促进CD38 mRNA和蛋白表达(P<0.05);NA还可显著降低TFEB的磷酸化水平,且这一效应也可被NED-19、BAPTA和CsA明显抑制(P<0.05);阻断CD38/NAADP信号通路可明显抑制NA诱导的溶酶体数量增加和溶酶体游离胆固醇及胞质胆固醇酯的外流(P<0.05);在LDLr/CD38双基因敲除巨噬细胞中,NA诱导的溶酶体数量增加和溶酶体游离胆固醇及胞质胆固醇酯的外流效应消失,CD38基因回补后,这一效应即可恢复(P<0.05).结论:CD38可经TFEB介导,触发巨噬细胞溶酶体再生,进而促进巨噬细胞溶酶体游离胆固醇和胞质中胆固醇酯的外流.

关键词：CD38、溶酶体再生、巨噬细胞、胆固醇、转录因子EB

所属期刊栏目：40

分类号：R329.21;R363.2(人体形态学)

资助基金：广东省基础与应用基础研究基金面上项目;广东省基础与应用基础研究基金面上项目;国家级大学生创新创业训练计划项目;广州医科大学学生创新能力提升计划项目;广州医科大学第二临床学院大学生科技创新项目

在线出版日期：2024-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：28-37