硫化氢通过激活ATP敏感性钾通道保护小鼠在体缺血损伤视网膜和原代缺氧视网膜神经节细胞

摘要：

目的:研究硫化氢(H2S)是否能够通过激活ATP敏感性钾通道(KATP通道)减轻小鼠原代缺氧视网膜神经节细胞及在体缺血视网膜损伤.方法:(1)培养分离纯化的小鼠原代视网膜神经节细胞(RGCs),给予缺氧处理或缺氧+硫氢化钠(NaHS)处理,利用Hoechst 33258染色和ELISA测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)浓度观察细胞死亡率变化;给予KATP通道激动剂或阻断剂,利用膜片钳、Western blot和钙成像技术观察硫化氢是否通过KATP通道减轻缺氧导致的细胞损伤;(2)在体建立小鼠视网膜缺血模型,模型动物分为5组(每组8只小鼠),分别为溶剂对照组、NaHS组、NaHS+KATP通道阻断剂组、KATP通道激动剂组和KATP通道激动剂+KATP通道断剂组,组织学切片观察视网膜各层厚度及RGCs层细胞密度变化.结果:(1)与氧糖剥夺(OGD)组相比,100 µmol/L和300 µmol/L NaHS可以显著减轻缺氧导致的原代RGCs细胞死亡率(P<0.01),同时也减少LDH释放量(1.5±0.3和1.3±0.2,P<0.01);与OGD组相比,NaHS和KATP通道激动剂可使细胞显著超极化(P<0.05,n=26),诱发放电显著减少(P<0.01,n= 29),显著减少钙内流(P<0.01,n=14)和cleaved caspase-3表达量(P<0.05,n=7),显著减轻氧糖剥夺导致的原代RGCs损伤;而KATP通道阻断剂使细胞去极化,诱发放电增多,增加钙离子内流和cleaved caspase-3表达,逆转了这种保护作用;(2)在体实验中,给予NaHS或KATP通道激动剂可以显著逆转缺血损伤导致的视网膜厚度降低(P<0.05,n=8);与缺血组比较,RGCs层细胞密度也显著增高(P<0.05,n=8),而KATP通道阻断剂能够抑制这种保护作用.结论:NaHS可通过激活KATP通道减轻原代缺氧小鼠RGCs和小鼠在体缺血视网膜导致的损伤.

关键词：缺血、缺氧、视网膜神经节细胞、硫化氢、ATP敏感性钾通道

所属期刊栏目：39

分类号：R774;R363(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金;山东省高校科技计划

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1859-1867