三七总皂苷对低氧状态下大鼠PASMCs增殖、凋亡及Notch3通路的影响

摘要：

目的:探讨在低氧(hypoxia,Hypo)条件下三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖和凋亡及其Notch3通路的影响.方法:以大鼠PASMCs为研究对象,饥饿24 h后将细胞分为6组:正常对照(control,Con)组、Hypo组、Hypo+PNS组、Hypo+DAPT{N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester;Notch3通路抑制剂}组、Hypo+过表达Notch3(Hypo+Notch3)组和Hypo+Notch3+PNS组.Con组置于常氧环境(21%O2、5%CO2、74%N2)下培养48 h,其余5组预先进行相对应的干预后置于低氧条件(5%O2、6%CO2、89%N2)下培养48 h.造模结束后用细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测各组细胞活力;EdU染色法检测细胞增殖;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR法检测PASMCs中Notch3、Hes-1、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和caspase-3的mRNA表达水平;Western blot检测PASMCs中Notch3、Hes-1、PCNA和caspase-3的蛋白表达水平;通过在细胞中过表达Notch3,探讨PNS是否通过Notch3影响PASMCs的增殖.结果:EdU和TUNEL结果表明,与Con组相比,Hypo组PASMCs增殖能力增强,且细胞凋亡显著减少(P<0.01),Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA和蛋白表达水平显著升高,而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);给予PNS干预后,Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);给予Notch3通路抑制剂DAPT干预后,Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05).进一步结果显示,在PASMCs中过表达Notch3可逆转PNS对Hypo诱导的PASMCs增殖的抑制作用(P<0.05).结论:PNS可通过降低Notch3表达,抑制Hypo诱导的大鼠PASMCs增殖并促进PASMCs凋亡.

关键词：三七总皂苷、低氧、肺动脉平滑肌细胞、细胞增殖、细胞凋亡、Notch3蛋白

所属期刊栏目：39

分类号：R544.1+6;R363(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：浙江省介入肺脏病重点实验室建设项目No.2019E10014

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1765-1772