血管紧张素Ⅱ通过抑制原癌基因c-SKI表达促进小鼠高血压性心肌纤维化

摘要：

目的:探讨原癌基因c-SKI(cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响.方法:将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组(n=6)和Ang Ⅱ组(n=6),利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ,给药4周,测定小鼠血压.取小鼠心脏组织进行HE和Masson染色检测病理学变化;免疫组织化学染色和Western blot检测c-SKI、CD31、平滑肌蛋白22(smooth muscle protein 22,SM22)、I型胶原(collagen type I,Col I)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle ac-tin,α-SMA)水平.用不同浓度的Ang Ⅱ处理人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs),显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力;用最低有效剂量的Ang Ⅱ处理HCAECs,免疫荧光染色和Western blot检测c-SKI、CD31、α-SMA、Col I和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)通路蛋白水平.过表达c-SKI和Ang Ⅱ联合处理HCAEC,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡情况,免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA、c-SKI、CD31、Col I、EMT通路蛋白和EMT标志因子的表达.结果:Ang Ⅱ处理后小鼠尾动脉收缩压升高,心室壁增厚,Col I和α-SMA表达显著上调(P<0.01),c-SKI、CD31和SM22表达显著下调(P<0.01).10 µmol/L Ang Ⅱ处理HCAECs后,细胞连接松散,细胞形态改变,且48 h细胞活力显著降低(P<0.01);免疫荧光染色和Western blot结果显示,Ang Ⅱ组Col I、α-SMA、Twist、Snail和p-Smad2/3蛋白水平显著升高(P<0.01),c-SKI和CD31表达显著下调(P<0.01).与Ang Ⅱ+vector组相比,过表达c-SKI联合Ang Ⅱ处理显著促进HCAECs活力(P<0.01),显著抑制细胞凋亡(P<0.01),显著上调c-SKI、CD31和E-cadherin表达(P<0.05),显著下调α-SMA、Col I、Twist、Snail、p-Smad2/3、N-cadherin和vimentin表达(P<0.01).结论:Ang Ⅱ可能通过调控c-SKI表达,促进小鼠高血压性心肌纤维化.

关键词：血管紧张素Ⅱ、高血压、心肌纤维化、原癌基因c-SKI、人冠状动脉内皮细胞、小鼠

所属期刊栏目：39

分类号：R544.1;R541.3;R363(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金No.81960052

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1738-1745