环状RNA MYO9A_043通过下调CPEB4表达发挥抑制小鼠心脏成纤维细胞纤维化表型的作用

摘要：

目的:研究环状RNA MYO9A_043(circular RNA MY09A_043,circMY09A_043)对小鼠心肌纤维化的调控作用和机制.方法:利用重组腺病毒circMYO9A_043介导其在C57BL/6乳小鼠心脏成纤维细胞(mouse car-diac fibroblasts,mCFs)中过表达,通过RT-qPCR和Western blot实验检测纤维化相关基因Ⅰ型胶原α1链(collagen type Ⅰ alpha 1 chain,Col1a1)、Ⅲ型胶原α1链(collagen type Ⅲ alpha 1 chain,Col3a1)和平滑肌肌动蛋白α2(smooth muscle actin alpha 2,Acta2)的表达.利用划痕实验检测mCFs的迁移能力.利用RNA测序分析和RT-qPCR验证circMYO9A_043对mCFs中胞质多腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4,CPEB4)等基因的下调作用.利用腺病毒介导mCFs过表达CPEB4,检测CPEB4对纤维化相关基因表达的影响.通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验检测CPEB4与纤维化相关基因的结合作用.进一步通过放线菌素D处理实验,检测mCFs中CPEB4对Col1a1、Col3a1和Acta2 mRNA的稳定作用.结果:利用腺病毒可以有效介导circMYO9A_043在mCFs中过表达.circMYO9A_043可显著下调Col1a1、Col3a1和Acta2表达,抑制mCFs的迁移能力(P<0.05).circMYO9A_043可显著降低mCFs中CPEB4的表达(P<0.01),过表达CPEB4可逆转circMYO9A_043对纤维化相关基因表达的抑制作用.RIP实验显示CPEB4与mCFs中纤维化相关基因的mRNA有显著结合作用(P<0.01),而放线菌素D处理实验结果显示CPEB4可显著增强上述基因mRNA的稳定性(P<0.05).结论:circMYO9A_043通过下调CPEB4的表达而抑制mCFs纤维化表型.

关键词：心肌纤维化、心脏成纤维细胞、环状RNA MYO9A_043、胞质多腺苷酸化元件结合蛋白4

所属期刊栏目：39

分类号：R363;R542.2(病理学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省自然科学基金资助项目;广东省自然科学基金资助项目;广东省自然科学基金资助项目;广东省自然科学基金资助项目;广东省自然科学基金资助项目;广州市基础与应用基础研究项目;广东省人民医院心血管专项;广东省人民医院国自然培育项目

在线出版日期：2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1225-1232