ATP酶抑制因子1对脂多糖诱导的小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应及线粒体自噬的影响

摘要：

目的:本研究旨在探索ATP酶抑制因子1(ATPase inhibitory factor 1,IF1)在脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症模型中的作用.方法:用LPS刺激小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S作为体外细胞炎症模型.利用CRISRP activation质粒构建过表达IF1的MH-S细胞系,采用Western blot及RT-qPCR检测IF1的表达;ELISA法检测细胞炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;JC-1和MitoSOX? Red分别检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、线粒体膜蛋白TOM20和线粒体自噬蛋白parkin水平;荧光共定位检测线粒体的标记探针MitoTracker Red与自噬相关蛋白LC3的共定位情况.结果:LPS刺激肺泡巨噬细胞后IF1表达水平降低,细胞炎症因子分泌增加(P＜0.01),MMP下降,ROS水平升高、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与parkin蛋白水平升高,TOM20蛋白水平下降(P＜0.01),Mito-Tracker Red与LC3蛋白共定位增加.上调IF1后,过表达组中IF1表达水平升高,细胞炎症因子分泌也相应减少,MMP和ROS水平恢复,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与parkin蛋白水平下降,TOM20蛋白水平升高,MitoTracker Red与LC3蛋白共定位减少.结论:IF1可能通过抑制肺泡巨噬细胞线粒体自噬并改善线粒体功能,从而减轻巨噬细胞炎症因子的分泌.

关键词：ATP酶抑制因子1、肺泡巨噬细胞、炎症反应、线粒体功能、线粒体自噬

所属期刊栏目：39

分类号：R364.5;R363.2(病理学)

资助基金：镇江市第一人民医院科研项目;江苏省中医药科技发展计划;镇江市科技计划项目

在线出版日期：2023-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：846-854