天然冰片通过触发铁死亡增强他莫昔芬对人乳腺癌T47D细胞的杀伤作用

摘要：

目的:探讨天然冰片(NB)增强人乳腺癌T47D细胞对他莫昔芬(TAM)的敏感性及其机制.方法:以6.25～800 μmol/L梯度浓度的NB与20 μmol/L TAM联合作用于体外培养的T47D细胞,处理时间为24 h,MTT实验检测细胞活力并计算TAM的半数抑制浓度(IC50),集落形成实验测定细胞集落形成率,以评估NB对TAM的增敏效应,并以流式细胞术检测NB联用TAM条件下细胞周期分布和凋亡率的变化.20 μmol/L TAM与400 μmol/L NB联合作用于T47D细胞24 h,以流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)和细胞活性氧(ROS)水平;比色法检测胞内谷胱甘肽(GSH)浓度;Western blot法检测铁死亡相关蛋白核因子E2相关因子2(Nrf2)、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平,以评估NB联合TAM是否引起T47D细胞铁死亡.以ROS抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)或铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)进行预处理,MTT实验检测细胞活力并计算TAM的IC50,评估主动干扰铁死亡是否影响NB增强TAM的细胞杀伤作用.结果:(1)联用NB可促进TAM对T47D细胞的杀伤作用:NB(200和400 μmol/L)与TAM联用导致TAM对T47D细胞的IC50降低(P＜0.01);细胞集落形成率受到抑制(P＜0.01);400 μmol/L NB联合20 μmol/L TAM可诱导T47D产生细胞周期S期阻滞(P＜0.05)和增加细胞凋亡(P＜0.01),晚期凋亡细胞占凋亡细胞的(78.0±6.8)%,而早期凋亡细胞仅占(22.0±6.8)%.(2)400 μmol/L NB联合20 μmol/L TAM触发T47D细胞铁死亡,表现为ROS积累增加(P＜0.01)、MMP降低(P＜0.01)、GSH浓度降低(P＜0.01)以及铁死亡相关蛋白Nrf2、xCT和GPX4表达下调(P＜0.05).(3)1 μmol/L NAC及1 μmol/L Fer-1均可逆转NB联合TAM诱导的T47D细胞增殖抑制(P＜0.01).结论:NB联合TAM通过触发T47D细胞铁死亡的机制,增强TAM对人乳腺癌T47D细胞的杀伤作用.

关键词：天然冰片、他莫昔芬、乳腺癌、活性氧、铁死亡

所属期刊栏目：39

分类号：R979.1;R737.9;R363.2(药品)

资助基金：国家自然科学基金;广东省医学科研基金资助项目

在线出版日期：2023-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：779-787