10.3969/j.issn.1000-4718.2023.04.010
GSTO1抑制TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化
目的:研究谷胱甘肽S-转移酶ω1(GSTO1)在转化生长因子β(TGFβ)诱导心脏成纤维细胞增殖与活化中的作用.方法:分离乳大鼠心脏成纤维细胞并进行体外培养.采用含绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒质粒构建对照(Ad-GFP)或GSTO1过表达(Ad-GSTO1)质粒并转染心脏成纤维细胞,再用大鼠TGFβ(rTGFβ)刺激细胞24 h,实验分为4组:Ad-GFP+PBS、Ad-GFP+rTGFβ、Ad-GSTO1+PBS和Ad-GSTO1+rTGFβ.运用qPCR和免疫荧光染色确定转染的有效性;Western blot检测GSTO1蛋白表达;划痕实验和EdU掺入实验评估细胞迁移和增殖;CCK-8实验评估细胞活力;Western blot和细胞免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平,并检测心脏成纤维细胞内P38 MAPK和Smad3信号通路相关蛋白水平.结果:与Ad-GFP+rTGFβ组相比,GSTO1过表达抑制TGFβ诱导的心脏成纤维细胞增殖(P<0.05),降低TGFβ刺激后α-SMA、Col I和FN的表达水平(P<0.05),抑制P38 MAPK/Smad3信号通路激活(P<0.05).结论:GSTO1过表达通过抑制P38 MAPK/Smad3信号通路而阻遏TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化.
心肌纤维化、谷胱甘肽S-转移酶ω1、心脏成纤维细胞、转化生长因子β、细胞增殖
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R542.2+3;R363.2(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2023-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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656-662