乳兔心脏成纤维细胞的原代培养及鉴定

摘要：

目的:探讨并建立乳兔心脏成纤维细胞原代培养方法.方法:选取新出生1 d的新西兰白兔,采用胰蛋白酶和II型胶原酶消化心脏组织,差速贴壁法分离和纯化心脏成纤维细胞;使用倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,绘制细胞生长曲线;采用CCK-8法检测细胞活力;波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞纯度;Western blot法检测异丙肾上腺素刺激心脏成纤维细胞后I型胶原蛋白(Col I)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平.结果:差速贴壁90 min后在相差显微镜下可见部分成纤维细胞已贴壁生长;3 d后成纤维细胞数量较前增多,形态多样,多为不规则的多边形及扁平形;5 d时成纤维细胞数量显著增多(P<0.05),细胞形态趋于多样性,细胞间完全融合;细胞生长曲线类似"S"形.波形蛋白阳性率可达95％.CCK-8实验结果显示在4～5 d细胞活力最强(P<0.05);给予第2代心脏成纤维细胞异丙肾上腺素刺激48 h后,Col I及α-SMA水平显著增加(P<0.05).结论:本研究建立了乳兔心脏成纤维细胞原代培养方法.

关键词：乳兔、原代培养、心脏成纤维细胞、细胞鉴定

所属期刊栏目：39

分类号：R363;R-332(病理学)

资助基金：国家自然科学基金;中国博士后科学基金资助项目

在线出版日期：2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：571-576