E2F调控lncRNA HOTAIR在高磷诱导VSMCs钙化中的作用机制研究

摘要：

目的:探讨转录因子E2F调控长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)HOTAIR在高磷(high phosphorus,HP)诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用及其机制.方法:体外培养人VSMCs,采用HP(10 mmol/Lβ-磷酸甘油酯)诱导构建VSMCs钙化模型,设置实验分组:正常对照(con?trol)组和HP组.采用试剂盒进行钙沉积含量测定;RT-qPCR检测VSMCs中E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA的表达;Western blot检测E2F和Klotho蛋白的表达.过表达E2F,设置实验分组:control组、HP组、HP+空载(HP+Adlaz)组和HP+过表达E2F(HP+AdE2F)组.茜素红染色评估细胞钙化并进行钙沉积含量测定;RT-qPCR检测VSMCs中E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA的表达;Western blot检测E2F和Klotho蛋白的表达;双萤光素酶报告基因检测验证E2F、lncRNA HOTAIR和Klotho的靶向关系.结果:与control组相比较,HP组细胞呈现明显的钙化,钙沉积含量增加;RT-qPCR显示E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA在HP组中表达下调;Western blot提示E2F和Klotho蛋白在HP组表达下调.过表达E2F后,HP+AdE2F组细胞较HP+Adlaz组减轻,钙沉积含量减少;RT-qPCR提示lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA在HP+AdE2F组中表达上调,Western blot显示E2F和Klotho蛋白在HP+AdE2F组中表达上调.双萤光素酶报告基因系统检测提示E2F的表达水平与lncRNA HOTAIR呈现显著正相关,同时表明Klotho为lncRNA HOTAIR的靶基因.结论:E2F通过调控lncRNA HOTAIR介导Klotho,从而抑制HP诱导的VSMCs钙化.

关键词：E2F转录因子、lncRNA HOTAIR、血管平滑肌细胞、钙化

所属期刊栏目：39

分类号：R363.2;R543(病理学)

资助基金：国家自然科学基金;江西省管理工程技术研究中心

在线出版日期：2023-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：96-102