牛痘相关激酶1在小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用及机制

摘要：

目的:探讨牛痘相关激酶1(vaccinia-related kinase 1,VRK1)在小鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖及迁移中的作用及机制.方法:培养小鼠肺动脉平滑肌细胞系,细胞传至第3代至第5代细胞进行后续实验.在低氧条件下检测不同低氧时间干预后PASMC中VRK1蛋白水平的变化.为探究VRK1在低氧所致PASMCs增殖和迁移中的作用,通过携带Vrk1特异短发夹RNA(Vrk1 short hairpin RNA,shVrk1)或相关阴性对照RNA(shCon)的慢病毒转染PASMCs,将转染后的PASMCs分别进行常氧、低氧处理,West?ern blot检测VRK1和β-catenin蛋白水平变化,采用Ki-67细胞免疫荧光染色法检测PASMCs的增殖活性,划痕实验检测PASMCs的迁移能力.加入40μmol/L SKL2001恢复β-catenin活性后再次检测上述指标.结果:与常氧组相比,低氧处理24 h和36 h后PASMCs中VRK1蛋白表达水平升高(P＜0.01).常氧培养条件下,shVrk1转染细胞中VRK1及β-catenin蛋白表达水平降低(P＜0.01).相较于常氧培养的shCon转染细胞,低氧条件下shCon转染细胞中Ki-67阳性细胞率升高,划痕愈合速度提高(P＜0.01).低氧培养条件下,shVrk1转染后细胞的Ki-67阳性细胞率降低,划痕愈合速度降低(P＜0.01).低氧培养条件下,shVrk1+SKL2001组β-catenin蛋白表达水平升高,Ki-67阳性细胞率及划痕愈合速度较shVrk1+DMSO组均升高(P＜0.01).结论:沉默Vrk1通过降低β-catenin的表达抑制低氧所致小鼠PASMCs体外的增殖和迁移.

关键词：肺动脉血管平滑肌细胞、牛痘相关激酶1、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：39

分类号：R544.1+6;R363.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金No.82070289

在线出版日期：2023-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：88-95