沉默驱动蛋白KIF11影响caspase-1介导的细胞死亡方式

摘要：

目的:探讨驱动蛋白家族成员11(KIF11)通过影响胱天蛋白酶1(caspase-1)介导的细胞死亡方式调控肿瘤发展的机制.方法:采用生物信息学分析KIF11在不同肿瘤中的表达及其与caspase-1和消皮素D(GSD?MD)的相关性,以及对肿瘤患者生存预后的影响;构建受体相互作用蛋白激酶2(RIPK2)/GFP和caspase-1质粒,以及共转染的野生型、KIF11低表达和KIF11过表达的人肾透明细胞癌786-O细胞系,探讨KIF11在caspase-1介导细胞死亡中的作用;活细胞成像观察细胞形态变化;免疫组化测定肾癌和癌旁组织中KIF11的表达;Western blot测定细胞焦亡通路相关蛋白水平.结果:生物信息学分析结果显示,KIF11在大多数恶性肿瘤中高表达;免疫组化发现,KIF11在肾癌中的表达高于正常组织.同时,KIF11与肾透明细胞癌中caspase-1和GSDMD表达呈正相关.活细胞成像显示,野生型和KIF11过表达的细胞大量起泡,随后释放凋亡小体(绳珠状细胞凋亡结构).相比之下,KIF11低表达的细胞变圆和肿胀,呈现细胞焦亡的典型特征,体积明显比野生型和KIF11过表达细胞大,细胞核和细胞质丢失,乳酸脱氢酶释放增加.同时,免疫荧光结果显示,caspase-1介导的细胞死亡有cleaved GSDMD表达.Western blot结果表明,转染RIPK2/caspase-1能够激活细胞焦亡通路,上调caspase-1 p20、GSDMD-NT和cleaved IL-1β蛋白水平.进一步通过PI和Hoechst染色,发现野生型细胞中91％的细胞凋亡,9％发生细胞焦亡;而在KIF11低表达细胞中,22％细胞发生凋亡,78％细胞发生焦亡.结论:KIF11作为一个致癌基因,在肿瘤组织中高表达;沉默KIF11可影响caspase-1介导的细胞死亡方式,以细胞焦亡为主.

关键词：驱动蛋白家族成员11、胱天蛋白酶1、细胞焦亡、细胞凋亡

所属期刊栏目：39

分类号：R363;R329.2+1(病理学)

资助基金：国家自然科学基金;嘉兴市卫健委分子诊断重点创新学科

在线出版日期：2023-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：29-36