Pim1调控巨噬细胞M1型极化介导血管内皮细胞炎症在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

摘要：

目的:探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响,并观察其在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用.方法:采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型,用Pim1特异性抑制剂SMI-4a和转染Pim1小干扰RNA(siPim1)进行干预,分为对照组、LPS组、LPS+SMI-4a组、LPS+siNC组和LPS+siPim1组.收集以上各组Raw264.7细胞上清作为条件培养液(CM)孵育原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为CMM0、CMM1、CMSMI-4a、CMsiNC和CMsiPim1组.动物采用颈动脉部分结扎术建立颈动脉AS模型,用6周龄ApoE-/-雄性小鼠18只建模后,随机分为模型组及SMI-4a干预组,每组各9只.采用油红O染色法观察颈动脉脂质蓄积变化.免疫荧光法和Western blot法检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Pim1、血管内皮标志物血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和血管细胞黏附分子1(VCAM1)在血管壁和细胞中的表达变化.结果:与对照组相比,LPS显著上调了Raw264.7细胞M1型极化标志物iNOS蛋白表达(P<0.01),同时Pim1蛋白表达也显著增高(P<0.05);SMI-4a干预和siPim1转染Raw264.7细胞,显著抑制LPS诱导的Pim1和iNOS表达(P<0.05或P<0.01).与CMM0相比,CMM1显著上调HUVEC中ICAM1和VCAM1蛋白表达(P<0.05或P<0.01);CMSMI-4a和CMsiPim1均显著抑制了HUVECs中ICAM1和VCAM1表达(P<0.01).动物实验水平,建模后结扎侧左颈动脉可见脂质沉积,有AS斑块形成,血管壁iNOS表达显著增多(P<0.01),Pim1、ICAM1和VCAM1蛋白表达上调(P<0.05).SMI-4a干预后,与模型组相比,左颈动脉脂质沉积被抑制,Pim1和iNOS表达显著降低(P<0.05或P<0.01),血管内皮标志物VE-cadherin蛋白水平升高(P<0.05),同时ICAM1和VCAM1蛋白表达显著下降(P<0.01).结论:抑制Pim1可以抑制ApoE-/-小鼠AS斑块形成,其机制可能与减少巨噬细胞M1型极化,降低内皮细胞炎症反应有关.

关键词：Pim1蛋白、M1型巨噬细胞、炎症、动脉粥样硬化

所属期刊栏目：38

分类号：R543.5;R363.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金;湖北医药学院研究生科技创新项目;湖北医药学院十四五湖北省高等学校优势特色学科群现代医学项目

在线出版日期：2023-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2113-2121