小分子热休克蛋白HSPB1通过上调SIRT1减轻H2O2诱导的人血管内皮细胞早衰

摘要：

目的:观察小分子热休克蛋白HSPB1是否减轻过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人血管内皮细胞早衰,并从沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)信号通路来探讨其可能的作用机制.方法:将常规培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)随机分为空白对照组、50μmol/L H2O2组和H2O2+HSPB1过表达组.通过RT-qPCR法检测p16和p21的mRNA表达;衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)活性检测试剂盒检测SA-β-Gal活性;Western blot检测p53、p16、p21、血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白水平;流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.同时,通过沉默SIRT1基因,观察SIRT1对HSPB1减缓H2O2诱导HUVECs衰老的影响.结果:与H2O2组比较,HSPB1过表达可减轻H2O2诱导的HUVECs损伤,包括p16和p21 mRNA水平降低、SA-β-Gal活性及ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01).同时,HSPB1过表达可使p53、p16、p21、VCAM-1和ICAM-1蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01).沉默SIRT1基因可逆转HSPB1对p16和p21 mRNA表达及组蛋白H2AX磷酸化的抑制作用(P<0.05或P<0.01).同时,沉默SIRT1基因导致HSPB1抑制SA-β-Gal活性作用也显著减弱(P<0.01).另外,SIRT1 siRNA逆转了HSPB1对p53、p21及p16蛋白表达的抑制作用(P<0.05或P<0.01).结论:小分子热休克蛋白HSPB1能够有效减轻H2O2诱导的HUVECs早衰,其机制与激活SIRT1信号通路,抑制氧化应激反应有关.

关键词：细胞早衰、HSPB1蛋白、SIRT1信号通路、氧化应激、血管内皮细胞

所属期刊栏目：38

分类号：R543.5;R363.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：湖南省自然科学基金青年项目;湖南省教育厅优秀青年项目

在线出版日期：2022-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1929-1937