整合素αV在应力刺激促心脏成纤维细胞活化中的作用机制研究

摘要：

目的:探究应力刺激对心脏成纤维细胞活化的影响及整合素αV(integrinαV)在其中可能的作用及其机制.方法:原代1周龄C57BL/6小鼠心脏成纤维细胞,分别以鼠尾I型胶原蛋白(collagen type I,Col I)制备胶和聚苯乙烯材质为软、硬基质培养条件,并结合siRNA下调硬基质培养的心脏成纤维细胞的integrinαV表达,将细胞分为软基质组(soft组)、硬基质组(stiff组)、siRNA阴性对照组(NC组)和integrinαV siRNA组(siRNA组).显微镜下白场成像评价心脏成纤维细胞形态及其伪足数量和形态;CCK-8及免疫荧光法检测心脏成纤维细胞活力和增殖能力;划痕实验检测心脏成纤维细胞迁移能力;Western blot法检测Col I、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle ac?tin,α-SMA)、III型胶原蛋白(collagen typeⅢ,ColⅢ)、integrinαV、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、p-FAK、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)及p-Akt的蛋白水平.结果:与soft组相比,stiff组心脏成纤维细胞表面积显著增大,伪足由丝状向板状演变(P<0.01),增殖能力及合成和分泌Col I和ColⅢ能力均显著增加(P<0.01),α-SMA蛋白表达增加(P<0.01),向肌成纤维细胞表型转化,同时integrinαV/FAK/Akt信号通路被激活.下调stiff组心脏成纤维细胞的integrinαV表达后,细胞板状伪足回缩,迁移能力降低(P<0.05),合成和分泌Col I和ColⅢ能力降低(P<0.01),同时抑制integrinαV/FAK/Akt信号通路的激活(P<0.01).结论:应力刺激通过integrinαV介导的FAK/Akt信号通路激活促使心脏成纤维细胞转分化为更活跃的肌成纤维细胞,发挥抗应力和细胞外基质蛋白重组的作用,从而参与心脏疾病的病理转归.

关键词：心脏成纤维细胞、应力刺激、整合素αV、黏着斑激酶、蛋白激酶B

所属期刊栏目：38

分类号：R542.2;R363.1(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金;上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划

在线出版日期：2022-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1345-1353