肝星状细胞SCAP特异性敲除对小鼠肝纤维化的影响

摘要：

目的:探讨固醇调节元件结合蛋白裂解活化蛋白(SCAP)在肝星状细胞中缺失能否延缓小鼠肝纤维化进程.方法:将SCAPloxP/loxP小鼠与Lrat-Cre工具鼠繁殖得到Lrat-Cre+/+SCAPfl/fl、Lrat-Cre+/?SCAPfl/fl和Lrat-Cre?/?SCAPfl/fl小鼠,并用PCR法对小鼠基因型进行鉴定.选取4～6周龄Lrat-Cre?/?SCAPfl/fl小鼠(雄性,n=8)作为对照(Con)组,Lrat-Cre+/+SCAPfl/fl和Lrat-Cre+/?SCAPfl/fl小鼠(雄性,n=8)作为实验(SCAP?/?)组,均给予高脂饮食16周.称量小鼠肝重和体重,计算肝指数;检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏形态,油红O染色观察肝脏脂质积聚,天狼星红染色评估肝脏纤维化程度;RT-qPCR和Western blot检测小鼠肝组织中TGF-β/Smad信号通路相关mRNA及蛋白表达.结果:小鼠基因型鉴定结果与预期一致.提取两组小鼠原代肝星状细胞,RT-qPCR结果显示SCAP?/?小鼠肝星状细胞中SCAP mRNA表达显著降低(P<0.01),免疫荧光染色显示SCAP?/?小鼠肝星状细胞中SCAP不表达,表明SCAP?/?小鼠模型建立成功.与Con组相比,高脂饮食喂养的SCAP?/?组小鼠体重(P<0.01)和肝重(P<0.05)显著降低,但肝指数无显著差异;血清中TC水平显著降低(P<0.05),TG、AST和ALT水平无显著差异;HE及油红O染色结果显示小鼠肝脏脂肪变性和脂质积聚无显著差异;天狼星红染色显示肝脏纤维化程度减轻(P<0.05);Smad2(P<0.05)和Smad3(P<0.01)的mRNA表达显著降低;Smad2/3和p-Smad2/3蛋白水平显著降低(P<0.05).结论:肝星状细胞中SCAP缺失可延缓小鼠肝纤维化发展的进程,并与TGF-β/Smad信号通路有关.

关键词：固醇调节元件结合蛋白裂解活化蛋白;肝星状细胞;肝纤维化;TGF-β/Smad信号通路

所属期刊栏目：38

分类号：R575.5;R363.2(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：250-258