杜仲皮水提取物调节circFADS2靶向miR-491-5p干预类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长与凋亡

摘要：

目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制.方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和2.7 g/L)处理RA-FLS,CCK-8法检测细胞活力,选取最适WEEC浓度进行后续实验.细胞分别转染pcDNA-circFADS2和/或anti-miR-491-5p,探讨WEEC对RA-FLS生长与凋亡的影响及分子机制:用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测cleaved caspase-3的蛋白水平;RT-qPCR检测环状RNA-FADS2(circular RNA-FADS2,circFADS2)和miR-491-5p的表达水平;双萤光素酶基因报告实验检测circ?FADS2和miR-491-5p的靶向关系.结果:不同浓度WEEC处理后,RA-FLS的活力降低,凋亡率升高,cleaved cas?pase-3蛋白水平升高,circFADS2表达水平降低,miR-491-5p表达水平升高(P<0.05).过表达circFADS2或抑制miR-491-5p表达后,WEEC处理的细胞活力升高,凋亡率及cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05).circFADS2靶向调控miR-491-5p,过表达miR-491-5p逆转了circFADS2质粒对WEEC处理的RA-FLS活力与凋亡的影响.结论:杜仲皮水提取物通过调节circFADS2/miR-491-5p抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长并促进其凋亡.

关键词：杜仲皮水提取物;环状RNA-FADS2;微小RNA-491-5p;类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞;细胞活力;细胞凋亡

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分类号：R593.22;R363.2(全身性疾病)

资助基金：舟山市科技计划项目No.2019c31113

在线出版日期：2021-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2044-2049