NSUN2通过靶基因PRPS2调控核苷酸代谢从而介导肝癌细胞的增殖

摘要：

目的:探讨NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)在肝癌发展中的功能和机制.方法:比较肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据集中肝癌组织与正常组织NSUN2的mRNA表达水平;Western blot检测9对肝癌患者肝癌组织与癌旁组织中NSUN2的蛋白表达水平;Kaplan-Meier法分析肝癌TCGA数据集中NSUN2对肝癌生存预后的影响;活细胞动态成像与分析系统记录经shNSUN2慢病毒感染的Huh7和SNU182细胞的实时生长情况及集落形成实验检测细胞增殖能力;基因富集分析(GSEA)肝癌TCGA数据库中高表达NSUN2组富集的信号通路,探索NSUN2可能甲基化的关键基因和参与的信号通路;Pearson法分析TCGA数据集中NSUN2与预测基因的相关性;在SNU182细胞中敲低NSUN2后,用RT-qPCR和Western blot验证预测基因表达的变化.结果:TCGA数据集分析结果及Western blot实验结果显示NSUN2在肝癌组织中高表达.敲低NSUN2后Huh7细胞和SNU182细胞的增殖能力降低.基因富集分析结果显示嘌呤和嘧啶代谢通路在高表达NSUN2组富集.重亚硫酸盐甲基化测序(Bisulfite-Seq)结果与基因富集分析结果存在共同变化基因有PRPS2、ADSL、POLR2D、CANT1、ENTPD4、TXNRD1和CAD.Pearson相关分析结果显示TCGA数据集中NSUN2与PRPS2的mRNA表达呈正相关(r=0.3283,P<0.05).RT-qPCR和Western blot结果验证了敲低NSUN2后抑制了SNU182细胞中PRPS2的mRNA和蛋白表达.RT-qPCR结果显示敲低NSUN2后嘌呤从头合成相关基因的表达降低.结论:NSUN2可能通过调控PRPS2的表达参与核苷酸代谢,从而影响肝癌细胞增殖.

关键词：NSUN2、肝癌、细胞增殖、PRPS2、核苷酸代谢

所属期刊栏目：37

分类号：R735.7;R730.23(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目No.81630072

在线出版日期：2021-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：640-645