体外肺癌上皮-间充质转化三维模型的建立及其对顺铂抵抗的机制研究

摘要：

目的:探索转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导三维培养肺癌细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及对顺铂抵抗的相关机制.方法:用荧光倒置显微镜、扫描电镜及激光共聚焦观察人非小细胞肺癌细胞系95D在TGF-β1刺激前后的形态及蛋白表达变化,Western blot检测三维培养95D细胞在TGF-β1刺激前后相关蛋白表达变化,MTT法检测95D细胞发生EMT前后对顺铂的敏感性变化.结果:在三维培养条件下,95D细胞在TGF-β1刺激后,细胞球出现塌陷、细胞离散、迁移等现象,细胞球之间互相融合.激光共聚焦结果显示95D细胞在TGF-β1刺激后,E-cadherin蛋白表达无变化,N-cadherin和vimen?tin蛋白表达显著上调.Western blot结果显示,在TGF-β1刺激后,95D细胞的E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),N-cadherin和vimentin蛋白表达上调(P<0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白水平升高(P<0.05).而LY294002和rapamy?cin可逆转TGF-β1诱导的上述蛋白表达(P<0.05).MTT结果显示,TGF-β1刺激组对顺铂的敏感性显著低于普通三维培养组(P<0.01),而LY294002和rapamycin增强TGF-β1刺激后95D细胞对顺铂的敏感性(P<0.01).结论:TGF-β1诱导三维培养肺癌细胞发生EMT及对顺铂抵抗,可能是通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路实现的.

关键词：肺癌、上皮-间充质转化、三维培养、耐药性、PI3K/AKT/mTOR信号通路

所属期刊栏目：37

分类号：R734.2;R730.23(肿瘤学)

资助基金：浙江省公益技术项目;杭州市社会发展科研项目

在线出版日期：2021-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：91-97