坏死性小肠结肠炎早产儿肠组织差异性表达nesfatin-1及机制探讨

摘要：

目的:分析nesfatin-1在坏死性小肠结肠炎(NEC)早产儿肠组织中的表达情况,并探讨nesfatin-1对脂多糖(LPS)诱导的NEC结肠细胞模型的影响及作用机制.方法:收集2017～2019年间在本院接受NEC肠道手术的早产儿中获得小肠组织.应用RT-qPCR检测nesfatin-1在NEC的mRNA在小肠组织中的表达.以人胎正常结肠上皮细胞HCoEpiC和人结肠癌细胞Caco-2为研究对象,分别采用nesfatin-1过表达载体及其阴性对照载体以及pcDNA-TLR4(Toll样受体4)处理细胞.采用ELISA法检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10的含量.采用Western blot分析nesfatin-1、TLR4、NLRP3、黑色素瘤缺乏因子-2(AIM2)、caspase-1和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达和共免疫沉淀法分析nesfatin-1与TLR4的关系.结果:NEC早产儿小肠组织中nesfatin-1的表达明显低于健康组(P<0.01).与对照组相比,LPS诱导的肠上皮细胞HCoEpiC和HT-29细胞中的nesfatin-1表达降低(P<0.01),而nesfatin-1转染逆转了LPS的刺激作用,并且nesfatin-1过表达降低了TNF-α和IL-6的水平(P<0.05),并增加了IL-10的水平(P<0.05).此外,nesfatin-1过表达抑制了NLRP3、AIM2、caspase-1和ASC的表达.TLR4在NEC组织样本中的表达明显高于健康婴儿(P<0.05).Pearson相关分析表明nesfatin-1和TLR4之间存在显著负相关(r=-0.816,P<0.01).通过免疫沉淀发现TLR4与nesfatin-1能够在细胞内共沉淀.结论:在NEC早产儿肠组织中,nesfatin-1通过靶向TLR4介导炎症反应,从而保护肠细胞免受LPS诱导的炎症反应,可能成为抗NEC治疗的潜在靶点.

关键词：早产儿、坏死性小肠结肠炎、Nesfatin-1、Toll样受体4

所属期刊栏目：36

分类号：R574.5;R363.2(消化系及腹部疾病)

资助基金：浙江省医药卫生计划项目面上项目No.2020KY879

在线出版日期：2021-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2227-2233