10.3969/j.issn.1000-4718.2020.06.017
桑寄生提取物联合miR-375对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响
目的:研究桑寄生提取物(SJS)联合微小RNA-375(miR-375)对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响及其作用机制.方法:将人原代骨性关节软骨细胞RPOC分为对照组(control)组、白细胞介素1β(IL-1β)组、IL-1β+SJS低剂量(SJS-L)组、IL-1β+SJS中剂量(SJS-M)组、IL-1β+SJS高剂量(SJS-H)组、IL-1β+anti-miR-NC组、IL-1β+anti-miR-375组、IL-1β+SJS-H+miR-NC组、IL-1β+SJS-H+miR-375组.MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-375的表达,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、P21、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的水平.结果:与control组比较,IL-1β组的RPOC活力(24 h、48 h和72 h)及cyclin D1和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),而P21、Bax和caspase-3蛋白的水平、细胞凋亡率及miR-375表达量均显著升高(P<0.05).与IL-1β组比较,IL-1β+SJS-M组和IL-1β+SJS-H组RPOC的活力(24 h、48 h和72 h)和cyclin D1表达显著升高(P<0.05),P21表达量显著降低(P<0.05);IL-1β+SJS-H组细胞的凋亡率、Bax及caspase-3蛋白水平、miR-375表达量明显减少(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著提高(P<0.05).与IL-1β+anti-miR-NC组比较,IL-1β+anti-miR-375组RPOC中miR-375表达量、P21、Bax、caspase-3蛋白水平、细胞凋亡率明显下降(P<0.05),cyclin D1、Bcl-2蛋白水平、细胞活力(24 h、48 h和72 h)显著升高(P<0.05).过表达miR-375能逆转SJS对IL-1β作用的RPOC活力、凋亡的影响.结论:桑寄生提取物可以促进IL-1β作用的RPOC活力,并抑制其凋亡,其机制与调控miR-375表达有关.
微小RNA-375、桑寄生提取物、白细胞介素1β、骨关节炎软骨细胞、细胞活力、细胞凋亡
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R684.3;R363.2(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
海南省卫生计生行业科研项目No. 18A200115
2020-07-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1082-1088