活性氧促进中性粒细胞与骨髓基质细胞黏附及机制初探

摘要：

目的:探讨活性氧对中性粒细胞与骨髓基质细胞(BMSCs)黏附的影响及其机制.方法:采用密度梯度离心法从小鼠胫骨和股骨分离骨髓中性粒细胞,并用DMSO诱导HL60细胞分化为成熟中性粒细胞(dHL60细胞).利用分光光度法检测CFDA-SE标记的小鼠骨髓中性粒细胞和dHL60细胞在H2 O2刺激下与BMSCs的黏附.利用荧光显微成像技术和Western blot检测携带去谷胱甘肽化酶谷氧还蛋白1(Grx1)表达载体的慢病毒感染的dHL60细胞中Grx1的表达.PCR检测Grx1敲除小鼠的基因型.结果:(1)Diff-Quick染色显示,分离的骨髓中性粒细胞纯度高于90％;H2O2处理后,中性粒细胞与BMSCs黏附率显著增加(P<0.01).(2)荧光显微镜观察和West-ern blot结果表明,Grx1稳转株dHL60细胞中Grx1的表达水平较空载体稳转株细胞显著增加;体外黏附实验表明过表达Grx1的dHL60细胞较对照组dHL60细胞,在相同H2 O2浓度下,黏附到BMSCs程度显著下降(P<0.01).(3)经PCR鉴定,实验所用基因敲除小鼠在全基因水平上未见Grx1;且敲除Grx1的小鼠较野生型小鼠,在相同浓度H2O2刺激下,其骨髓中性粒细胞与BMSCs黏附率显著升高.(4)血管细胞黏附分子1(VCAM-1)抗体预处理BM-SCs后,由H2 O2引起的dHL60与BMSCs之间的黏附增强回复到了静息水平.结论:活性氧促进骨髓中中性粒细胞与BMSCs的黏附,其可能的机制是通过诱导VCAM-1黏附信号的S-谷胱甘肽化.

关键词：活性氧、中性粒细胞、骨髓基质细胞、细胞黏附、谷氧还蛋白1

所属期刊栏目：34

分类号：R392.33;R363

资助基金：国家自然科学基金资助项目31401188,81470931,31701098,81803648,81803183;四川省应用基础研究计划项目2016JY0027;四川大学优秀青年学者科研基金项目2016SCU04A08

在线出版日期：2019-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2255-2260