10.3969/j.issn.1000-4718.2018.09.020
miR-7敲减CD4+T细胞过继转输对小鼠急性肝损伤模型的影响
目的:观察过继转输微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(knockdown,KD)CD4+T细胞对小鼠急性肝损伤模型的影响,并探讨其意义.方法:利用磁珠分选技术分别获得正常野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠脾脏中CD4+CD62L+T细胞;CFSE染色标记后,按每只小鼠2×106个细胞,经尾部静脉注射给同系WT小鼠,并利用伴刀豆球蛋白A建立急性肝损伤模型;观察过继转输后2组小鼠肝脏的形态、重量及其重量指数的变化;HE染色观察小鼠肝脏组织的病理学变化;real-time PCR检测小鼠肝脏组织中凋亡相关分子Bax和P53的表达;流式细胞术检测小鼠肝脏组织中CFSE标记的CD4+T细胞活化相关膜分子CD62L表达水平以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达变化.结果:与对照组相比,过继转输miR-7KD小鼠CD4+CD62L+T细胞组(miR-7KD转输组)小鼠的肝脏重量明显减轻(P<0.01),但重量指数显著增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD转输组的肝脏细胞损伤增加;real-time PCR结果显示miR-7KD转输组肝脏组织中凋亡相关细胞分子Bax和P53的相对表达水平均明显升高(P<0.05);流式细胞术检测结果进一步显示肝脏组织中的CFSE+细胞活化相关分子CD62L的表达水平明显降低(P<0.01),细胞因子IFN-γ的表达水平明显增加(P<0.05),而IL-4的表达水平显著降低(P<0.01).结论:过继转输miR-7敲减CD4+T细胞可显著加重急性肝损伤模型小鼠的肝组织损伤.这为后续深入探讨急性肝损伤的发生机制提供了重要的实验基础.
微小RNA-7、急性肝损伤、CD4+T细胞、细胞因子、细胞凋亡
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R394-33;R363
国家自然科学基金资助项目31760258;贵州省高层次创新人才计划黔科合人才20164031号;遵义医学院优秀青年人才计划项目15ZY-001
2018-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1660-1665