10.3969/j.issn.1000-4718.2018.07.014
过表达P21减轻顺铂诱导的H K-2细胞损伤
目的:探讨P21在顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用.方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及Western blot法检测顺铂诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中P21的表达水平.在HK-2细胞中过表达P21后,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力及细胞凋亡;Western blot检测急性肾损伤标志物肾损伤因子1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的表达及细胞凋亡效应蛋白caspase-3的表达;此外,还同时检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白水平及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平以反映细胞内质网应激相关信号通路的活性.结果:在肾小管上皮细胞中,顺铂可剂量及时间依赖性上调P21的mRNA及蛋白表达.过表达P21可逆转顺铂诱导的HK-2细胞凋亡,并使KIM-1、NGAL、GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP和cleaved caspase-3的蛋白水平明显减少.结论:过表达P21可减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞急性损伤,其机制可能与调控HK-2细胞内质网应激信号通路,抑制细胞凋亡有关.
P21、急性肾损伤、内质网应激、细胞凋亡
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R363(病理学)
2015年河北省卫计委课题20150431
2018-08-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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