芥子碱对H2O2诱导BMSCs成脂分化的影响

摘要：

目的:探讨中药有效单体芥子碱对过氧化氢(H2O2)诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响.方法:先通过全骨髓培养法和流式细胞术鉴定并筛选未分化的大鼠BMSCs;一方面利用H2O2诱导BMSCs成脂分化建立模型,一方面采用CCK-8实验检测芥子碱对BMSCs的毒性作用;模型建立成功与芥子碱药用浓度确定后进行油红O半定量实验检测细胞中脂滴含量,筛选出最佳的药物浓度;随后采用油红O染色拍片直接观察药物干预24 h后对BMSCs成脂分化的影响,并且采用qPCR和Western blot 实验检测BMSCs中成脂分化相关蛋白——脂肪细胞蛋白2(aP2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)的变化情况.结果:浓度为200 μmol/L的H2O2作用1 h可诱导BMSCs成脂分化;CCK-8实验结果显示在芥子碱浓度<40 μmol/L的条件下对BMSCs的活力没有显著影响,同时结合油红O半定量实验结果筛选出芥子碱抑制其成脂分化的最佳浓度为15 μmol/L;油红O染色实验观察到芥子碱组(15 μmol/L)组脂滴较模型组数量明显减少,qPCR和Western blot实验结果亦显示正常对照组和芥子碱组aP2、PPARγ和Glut4表达均低于模型组(P<0.01).结论:芥子碱能够抑制H2O2诱导BMSCs向脂肪细胞分化,其机制可能与PPARγ/AMPK信号通路有关.

关键词：芥子碱、骨髓间充质干细胞、成脂分化、过氧化氢、氧化应激

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分类号：R329.2+5;R285.5(人体形态学)

资助基金：广东省科技计划粤港澳联合项目,2016A050503039;广东省自然科学基金资助项目2017A030312009

在线出版日期：2018-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：918-924