人参皂苷Rg1通过抑制Wnt/β-catenin通路促进退变人腰椎间盘髓核细胞的生长及胞外基质合成

摘要：

目的:探讨人参皂苷Rg1对退变人腰椎间盘髓核细胞(HNPCs)生长的调控及其作用机制.方法:培养正常HNPCs,构建HNPCs的氧糖剥夺(OGD)模型模拟退变HNPCs的微环境.光镜观察正常HNPCs和OGD组细胞的形态.分别给予25、50和100 μmol/L人参皂苷Rg1后,用real-time PCR和Western blot法分别检测II型胶原(collagen II)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)的表达,CCK-8法检测细胞活力的变化,real-time PCR法检测增殖蛋白Ki67的转录水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,Western blot法检测Wnt/β-catenin通路蛋白的表达.加入Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl后,检测其对Wnt/β-catenin通路蛋白、细胞活性、细胞凋亡及基质合成蛋白表达的影响.结果:正常HNPCs细胞贴壁快,形态呈类圆形,胞质丰富;OGD组细胞贴壁较慢,形态多为长梭形,胞质减少,初步证实了退变HNPCs模型构建成功.与HNPCs组相比,OGD组中collagen II和aggrecan的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05),人参皂苷Rg1可升高collagen II和aggrecan的表达(P<0.05).与HNPCs组相比,OGD组的细胞活力显著降低(P<0.05),Ki67表达下调(P<0.05),而不同浓度的人参皂苷Rg1可增加细胞活力和上调Ki67的表达(P<0.05).同时,不同浓度的人参皂苷Rg1可减少OGD增加的细胞凋亡和caspase-3活性(均P<0.05).此外,100 μmol/L人参皂苷Rg1可显著减弱OGD触发的Wnt/β-catenin通路的活化(P<0.05).而用Wnt通路激动剂LiCl处理后可明显减弱人参皂苷Rg1对OGD细胞的保护作用(P<0.05),提示该通路参与人参皂苷Rg1对退变HNPCs的保护作用.结论:人参皂苷Rg1可通过抑制Wnt/β-catenin通路促进HNPCs的生长和胞外基质合成.本研究将为退变HNPCs的防治提供新的思路.

关键词：人参皂苷Rg1、人腰椎间盘髓核细胞、细胞活力、细胞凋亡、Wnt/β-catenin通路

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分类号：R681.53;R285.5(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：705-710