RELMα/FIZZ1信号通路对血管新生影响的细胞学研究

摘要：

目的:探讨类抵抗素分子α/炎症区域分子1(RELMα/FIZZ1)对小鼠主动脉血管平滑肌细胞MO-VAS Ca2+/CaM信号通路的调控及小鼠主动脉内皮细胞(MAEC)管腔形成能力的影响.方法:将离体培养的MAEC分为pGSadeno-HK组、pGSadeno-RELMα/FIZZ1组、pGSadeno-shRNA control 组和pGSadeno-shRNA RELMα/FIZZ1组,MTT法检测细胞活力的变化,基质胶管腔形成实验检测血管生成情况;同时将离体培养的MOVAS细胞分为 pGSadeno-HK 组、pGSadeno-RELMα/FIZZ1组、pGSadeno-shRNA control 组和 pGSadeno-shRNA RELMα/FIZZ1组,MTT法检测MOVAS的细胞活力变化,Fluo-3 AM钙离子荧光探针和流式细胞术检测细胞内的Ca2+浓度,并用real-time PCR和Western blot检测钙调蛋白(CaM)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的mRNA和蛋白表达水平.结果:过表达RELMα/FIZZ1显著提高MAEC的细胞活力,管腔形成数目显著增加(P<0.05);干扰RELMα/FIZZ1的表达显著抑制MAEC的细胞活力和管腔形成(P<0.05).过表达RELMα/FIZZ1显著促进MOVAS的细胞活力,细胞内Ca2+平均荧光强度增强,CaM和MLCK的mRNA和蛋白的表达水平均显著上调(P<0.05);干扰RELMα/FIZZ1的表达显著抑制MOVAS的细胞活力,细胞内Ca2+平均荧光强度降低,CaM和MLCK的mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05).结论:RELMα/FIZZ1信号通路参与血管管腔的生成,其机制可能是通过细胞内Ca2+浓度变化调节细胞内CaM和MLCK的表达,进而对管腔相应功能产生影响.

关键词：RELMα/FIZZ1信号通路、血管生成、Ca2+/CaM信号通路、细胞活力

所属期刊栏目：34

分类号：R329.2+5;R363(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81660080;国家临床重点专科建设项目2013544;贵州省科学技术厅临床研究中心资助项目黔科合平台人才20175405

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：650-656