克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞活力和代谢的影响

摘要：

目的:研究克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞EA.hy926生长及分泌活性的影响,探讨克拉屈滨通过抑制内皮细胞活力发挥抗肿瘤的作用机制.方法:采用CCK-8法检测不同浓度(0.4~1 μmol/L)克拉屈滨对内皮细胞活力的影响;用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot 检测细胞凋亡和周期相关蛋白的表达水平;用ELISA法检测上清液肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平;Gries法检测上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量.结果:克拉屈滨作用48 h对细胞活力有明显的抑制作用,其半数抑制浓度约为3.644 μmol/L,随药物浓度升高和作用时间的延长而抑制作用增强.克拉屈滨作用48 h后,细胞周期被明显阻滞在S期, 0.4 μmol/L时S期细胞约43.74%,1 μmol/L时S期细胞约77.23%.克拉屈滨处理后,各组内皮细胞的凋亡率没有显著差异.克拉屈滨处理后,caspase-3与Bax蛋白水平无明显差异;p21水平随着药物浓度增加而增高,而p53水平随着药物浓度增加而降低(P<0.05).克拉屈滨处理后,上清液中TGF-β1和TNF-α水平升高,VEGF含量减少(P<0.05).克拉屈滨处理后,上清液中NO 含量减少(P <0.05).结论:克拉屈滨能明显抑制内皮细胞EA.hy926的活力,其主要机制与细胞周期阻滞有关.同时克拉屈滨能促进内皮细胞EA.hy926分泌TNF-α和TGF-β1,抑制其分泌VEGF和NO.

关键词：克拉屈滨、人脐静脉内皮细胞、细胞周期、细胞因子

所属期刊栏目：34

分类号：R965;R329.2+5(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81270568

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：605-610