CREB-shRNA对氧糖剥夺/复氧皮层神经元线粒体形态和凋亡的影响

摘要：

目的: 探讨沉默CREB基因对氧糖剥夺/复氧神经元线粒体形态及细胞凋亡的影响.方法: 3条靶向CREB基因的shRNA片段插入慢病毒载体pLentiLox3.7(PLL),与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞包装病毒颗粒后感染原代皮层神经元,Western blot检测CREB蛋白的沉默情况;分别用MitoTracker red、TUNEL和Western blot实验检测氧糖剥夺/复氧诱导CREB基因沉默后神经元的线粒体形态、细胞凋亡和Bcl-2、Bax的表达情况.结果: pLL-CREB-shRNA1为最有效的shRNA,其抑制皮层神经元CREB基因表达率高达80%.CREB基因沉默促进氧糖剥夺/复氧诱导的皮层神经元线粒体向点状、片段化形态改变,同时降低Bcl-2表达、促进Bax的表达并加重细胞凋亡(P<0.05).结论: CREB-shRNA重组慢病毒载体可特异性抑制神经元CREB基因的表达,CREB基因沉默加重氧糖剥夺/复氧诱导的皮层神经元线粒体形态改变,促进细胞凋亡.

关键词：CREB基因、重组慢病毒载体、神经元、氧糖剥夺/复氧、线粒体

所属期刊栏目：33

分类号：R363.2+1(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81471254,81171081;河南省基础与前沿技术研究计划162300410102;河南省博士后科研资助2015051;河南省高等学校重点科研项目15A180031,16A330001

在线出版日期：2017-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1487-1493