内皮祖细胞培养上清对高氧暴露新生大鼠肺结构的改善作用

摘要：

目的: 研究内皮祖细胞培养上清(endothelial progenitor cell-conditioned medium,EPC-CM)对高氧暴露新生大鼠肺损伤时肺泡结构的改善作用及其机制.方法: 从新生SD大鼠骨髓中获取内皮祖细胞并鉴定,收集第3代细胞的培养上清备用.另取新生SD大鼠40只随机分为4组,即空气组:仔鼠在空气(21% O2)中喂养21天;高氧组:仔鼠在85% O2中喂养21天;内皮细胞基础培养基 (endothelial cell basal medium, EBM)干预组:仔鼠在85% O2中喂养至第14天时,经气道给予100 μL EBM,然后喂养至第21天;EPC-CM干预组:仔鼠在85% O2中喂养至第14天,经气道给予100 μL EPC-CM,喂养至第21天.第21天处死小鼠,左肺用4%多聚甲醛固定,留作石蜡切片,随后HE染色进行肺组织病理形态学观察,并做辐射状肺泡计数(radical alveolar count,RAC)及肺泡平均线性截距(mean linear intercept,MLI)测量;免疫组织化学方法对血管内皮细胞FVIII染色,计数肺组织微血管密度;右肺留作实时荧光定量PCR检测肺组织KGF、VEGF、SP-A和SP-C的mRNA表达.结果: 培养所得细胞具有典型的EPCs形态改变,能结合异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素1并摄取DiI荧光标记的乙酰化低密度脂蛋白.高氧组及EBM干预组的仔鼠体重、RAC、MLI和微血管密度较空气组显著降低(P<0.05),EPC-CM干预组的RAC和微血管密度较高氧组和EBM干预组明显增加(P<0.05),而体重和MLI的变化无明显差异,但有增高的趋势.高氧组和EBM干预组肺组织KGF、VEGF、SP-A和SP-C的mRNA表达较空气组显著降低(P<0.05),EPC-CM干预组的表达显著高于高氧组和EBM干预组(P<0.05).结论: EPC-CM可改善高氧暴露新生大鼠的肺泡化和肺血管发育,可能与促进肺内KGF和VEGF mRNA的表达相关.

关键词：高氧、内皮祖细胞、肺损伤、旁分泌

所属期刊栏目：33

分类号：R363;R722.1(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81270727

在线出版日期：2017-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1467-1474