MicroRNA-483-3p对人神经胶质瘤细胞的作用

摘要：

目的: 探讨microRNA (miRNA)-483-3p对人神经胶质瘤细胞A172生长和迁移能力的影响及潜在作用机制.方法: 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测人肾胚细胞系HEK-293和不同神经胶质瘤细胞株(A172、U251和SHG44)中miRNA-483-3p的表达水平.转染miRNA-483-3p抑制序列(miRNA-483-3p inhibitor)下调A172细胞中miRNA-483-3p的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力和周期分布;Transwell实验检测细胞的迁移;Western blot检测周期相关调控因子及上皮-间充质转化相关蛋白的水平.双萤光素酶报告基因分析法预测及验证其可能的靶基因.结果: miRNA-483-3p在各型神经胶质瘤细胞中高表达.沉默miRNA-483-3p后,A172细胞的活力下降并呈现出明显的周期阻滞,且细胞迁移率也显著降低.同时细胞中cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶4、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白、N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平显著升高.双萤光素酶报告基因分析显示Smad4是miRNA-483-3p的可能作用靶点,A172细胞共转染miRNA-483-3p inhibitor和Smad4 siRNA可部分逆转miRNA-483-3p介导的细胞增殖及迁移抑制.结论: 沉默miRNA-483-3p可通过靶向Smad4抑制神经胶质瘤细胞株A172的生长及迁移.

关键词：MicroRNA-483-3p、神经胶质瘤、细胞活力、细胞迁移、Smad4

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分类号：R739.41;R730.23(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81372269

在线出版日期：2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1163-1170