TRPC6在IL-1β诱导类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖中的作用

摘要：

目的: 应用RNA干扰技术研究瞬时受体电位通道6(TRPC6)对IL-1β诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖的影响.方法: RT-qPCR法检测RA和骨关节炎(OA)患者滑膜组织中TRPC6 mRNA的表达水平.组织块联合酶消化法培养RA-FLS.流式细胞术鉴定RA-FLS.将不同浓度(0、0.25、0.5、1、2、4、8、16 μg/L)的重组人 IL-1β与 RA-FLS共培养36 h,CCK-8法检测细胞活力的改变;16 μg/L的IL-1β作用RA-FLS不同时间(12、24、36、48、60、72 h),CCK-8法检测细胞活力的改变.特异性TRPC6-siRNA转染RA-FLS后,采用RT-qPCR和Western blotting 检测沉默效率.在IL-1β存在和不存在的条件下,CCK-8法、EdU标记法和流式细胞术检测TRPC6干扰组与对照组的细胞活力、EdU阳性细胞比率和(G2/M+S)期比率的差异.结果: RA患者滑膜组织中TRPC6的mRNA表达水平相对于OA患者明显增加(P<0.05).TRPC6-siRNA能显著降低RA-FLS中TRPC6 mRNA和蛋白的表达(P<0.05).IL-1β能诱导RA-FLS增殖(P<0.05).沉默TRPC6后,在IL-1β的诱导环境下,特异性干扰组RA-FLS 的活力、EdU阳性细胞比率和(G2/M+S)期比率与空白组和对照组相比均明显降低(P<0.05),而在不含IL-1β的条件下,干扰组与空白组和对照组相比差异均无统计学显著性.结论: TRPC6参与IL-1β诱导的RA-FLS增殖过程,沉默TRPC6能降低IL-1β诱导的RA-FLS增殖水平.

关键词：瞬时受体电位通道6、类风湿关节炎、滑膜细胞、细胞增殖

分类号：R363.2;R593.22(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81470205;广州市属高校科研计划2012C043

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：627-634