自噬参与香烟烟雾提取物诱导的肺动脉内皮细胞凋亡

摘要：

目的: 探讨自噬在香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)诱导人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cells,HPAECs)凋亡中的作用.方法: 常规培养HPAECs,分为对照组、CSE组、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组和3-MA+CSE组,应用Hoechst 33342 染色和 Annexin V/PI 流式细胞术检测细胞凋亡,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色观察细胞自噬泡形成,Western bolt 测定自噬相关蛋白 beclin-1、LC3 与cleaved caspase-3的水平.结果: MDC染色示CSE处理可以诱导细胞产生自噬泡,Western blot结果示自噬相关蛋白LC3及beclin-1表达升高,3-MA 预处理后抑制上述蛋白的表达.Hoechst 33342 染色和 Annexin V/PI 流式结果显示CSE组细胞凋亡率较对照组明显增加,在3-MA+CSE组,细胞凋亡率较CSE组进一步升高;同时,CSE组细胞cleaved caspase-3蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05),3-MA+CSE组的caspase-3表达较CSE组进一步升高.结论: CSE能诱导HPAECs发生自噬和凋亡,抑制自噬能够进一步促进CSE对HPAECs的凋亡作用,这种作用可通过激活caspase-3实现.

关键词：自噬、人肺动脉内皮细胞、香烟烟雾提取物、细胞凋亡

分类号：R363.2(病理学)

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：603-607