PDL1Ig基因修饰的骨髓间充质干细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

摘要：

目的：探讨程序性死亡因子配体1免疫球蛋白（ PDL1 Ig）基因转染骨髓间充质干细胞（ BMSCs）抑制大鼠原位肝移植免疫排斥反应的机制。方法：培养并鉴定大鼠的BMSCs，重组腺病毒pAdEasy－1／PDL1 Ig感染BMSCs 72 h后，提取细胞总蛋白，采用Western blot法检测转染后BMSCs中PDL1 Ig的蛋白表达。混合淋巴细胞反应检测未转染和转染后的BMSCs对外周血T淋巴细胞活力的抑制作用。以雄性Wistar大鼠为供体，以雄性SD大鼠为受体，采用改良的两袖套法进行原位肝移植，建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。随机分为对照组、BMSCs治疗组、空载体BMSCs治疗组（ BMSCs／GFP）和转基因治疗组（ BMSCs／PDL1 Ig），每组10对。每组随机取5只于术后第7天处死，检测外周血白细胞介素（ IL）－2、IL－4和干扰素γ（ IFN－γ）水平，检测肝功能情况，光学显微镜下观察移植肝的病理学变化，另外5只观察生存情况及时间。结果：重组pAdEasy－1／PDL1 Ig感染BMSCs 72 h后， BMSCs中有PDL1 Ig的蛋白表达。 BMSCs／PDL1 Ig抑制淋巴细胞活力的作用强于BMSCs／GFP。 BMSCs／PDL1 Ig组的IL－4水平明显高于其它3组，IL－2和IFN－γ水平也明显降低（ P＜0．05）。各实验组移植后7 d检测肝功能，发现BMSCs／PDL1 Ig组的肝功能改善最明显，ALT、AST和TBil基本达到正常水平，与对照组比较差异有统计学显著性，与BMSCs治疗组和空载体BMSCs治疗组比较差异也有统计学显著性。肝组织病理检查结果显示对照组移植肝发生了重度排斥反应，BMSCs治疗组和空载体BMSCs治疗组移植肝亦发生排斥反应，但与对照组比较程度较轻， BMSCs／PDL1 Ig组移植肝几乎没有排斥反应，受体存活时间大部分超过100 d，显著长于其它3组（ P＜0．05）。结论：PDL1 Ig修饰的BMSCs可抑制大鼠肝移植排斥反应，诱导肝移植免疫耐受，其效果优于BMSCs单用。

关键词：肝移植、免疫耐受、腺病毒、骨髓间充质干细胞、程序性死亡因子配体1免疫球蛋白

所属期刊栏目：32

分类号：R392.4;R363

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1279-1284