MicroRNA-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应

摘要：

目的：探讨microRNA-132（ miR-132）通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法：向大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中转染miR-132 mimic、mimic阴性对照（ NC）、miR-132 inhibitor或inhibitor NC，转染后用脂多糖（ LPS）和（或）乙酰胆碱（ ACh）处理细胞；采用real-time PCR检测乙酰胆碱酯酶（ AChE）的mR-NA表达；采用Western blot检测细胞中AChE、信号转导及转录激活因子3（ STAT3）和磷酸化STAT3（ p-STAT3），以及细胞浆和细胞核中核因子κB（ NF-κB）蛋白的改变；采用AChE活性测试盒检测细胞上清液中AChE活性的改变；采用免疫荧光检测NF-κB的核移位变化。结果：上调或下调miR-132不影响AChE的mRNA相对表达水平；上调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著降低（P＜0.05），下调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著升高（P＜0.05）。当给予LPS＋ACh作用时，miR-132 mimic组对NF-κB p65核移位的抑制作用较mimic NC组更强（P＜0.05），miR-132 inhibitor组较inhibitor NC组更弱（P＜0.05）；miR-132 mimic组对STAT3及p-STAT3蛋白的抑制作用较mimic NC组更强（P＜0.05）。结论：miR-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制可能是miR-132靶向作用AChE，抑制AChE对ACh的水解作用，从而增强 ACh的抗炎作用，抑制NF-κB 及STAT3的活化。

关键词：MicroRNA-132、乙酰胆碱酯酶、乙酰胆碱

所属期刊栏目：32

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金资助项目 No．81101410；No．81460292；江西省自然科学基金资助项目20122BAB205002

在线出版日期：2016-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：261-266