10.3969/j.issn.1000-4718.2016.01.007
过表达miR-132改善阿尔茨海默病样学习记忆障碍
目的:获得过表达微小RNA-132(microRNA-132,miR-132)的慢病毒,并检测对Tg2576小鼠学习记忆损伤的改善.方法:从小鼠脑组织中克隆miR-132成熟序列上下游各100 bp的基因,将基因克隆至慢病毒表达载体pLenti7.3,酶切鉴定并且DNA序列测定正确.pLenti7.3-miR-132和ViraPower Packaging Mix共转染293FT细胞.72 h后收获上请,采用超速离心和聚乙二醇法纯化病毒颗粒并分装保存.分别以病毒颗粒感染细胞系和小鼠海马组织验证病毒的感染能力.Tg2576小鼠海马区注射病毒,Western blot和Morris水迷宫分别检测记忆相关蛋白水平和空间学习记忆能力.结果:所包装的miR-132病毒颗粒能够高效地感染细胞系,并且在体内也有理想的感染效率.和对照组相比,过表达miR-132的Tg2576小鼠PSD95和GluR1明显升高,并且空间依赖的学习记忆能力明显提高.结论:过表达miR-132通过影响突触相关蛋白PSD95和GluR1的水平改善Tg2576小鼠的空间学习记忆能力障碍.
微小RNA-132、病毒包装、Tg2576小鼠、学习、记忆
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R363.1+4(病理学)
国家自然科学基金资助项目81401062,U1504809
2016-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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