Hsa－miR－218靶向调控 LASP1对宫颈癌 HeLa 细胞生长的影响

摘要：

目的：探讨人微小RNA－218（Homo sapiens microRNA－218， hsa－miR－218）对宫颈癌HeLa细胞生长的影响及分子机制。方法：构建hsa－miR－218的重组慢病毒表达载体pmiR－218，并将pmiR－218感染至HeLa细胞，台盼蓝拒染法检测细胞数量的变化，WST－8法检测细胞活力，构建萤光素酶报告基因载体验证miR－218与LIM和SH3蛋白1（LASP1）的相互结合作用，real－time PCR检测LASP1的mRNA相对表达水平，Western blot 检测LASP1蛋白的表达水平。结果：经DNA测序证实与设计完全一致，测序结果显示成功构建了重组慢病毒表达载体pmiR－218。 pmiR－218转染HeLa细胞72 h后HeLa细胞存活数量为176±9，对HeLa细胞活力的抑制率具有时间效应关系，较空白对照组比较，差异显著（P＜0．05）；萤光素酶活性结果显示，克隆LASP1－3’UTR的质粒与miR－218 mimics共转染293T细胞，引起萤光素酶活性的减低；real－time PCR 结果显示转染pmiR－218后，miR－218表达水平增加；过表达miR－128能下调LASP1 mRNA及蛋白的相对表达水平，与空白对照组及阴性对照组比较，差异显著（ P＜0．01）。结论：pmiR－218有效抑制HeLa细胞的生长，并具有时间－效应关系，其机制可能是miR－218通过靶向结合LASP1的3’UTR，从而下调其在HeLa细胞的表达有关。

关键词：人微小RNA-218、LIM和SH3蛋白1、宫颈癌、HeLa细胞

分类号：R730.23(肿瘤学)

资助基金：广州市番禺区科技局珠江科技新星项目2013－专－15－6．09

在线出版日期：2015-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1572-1577