10.3969/j.issn.1000-4718.2015.02.008
Hedgehog/Gli1通路在雷奈酸锶促进骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用
目的:探讨Hedgehog/Gli1信号通路在雷奈酸锶( strontium ranelate , Sr )促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:体外分离培养大鼠BMSCs,诱导其成骨分化,根据实验目的加入不同浓度的Sr、Hedgehog受体拮抗剂cyclopamine ( Cy)及Gli1小干扰RNA( Gli1-siRNA)。用Western blotting法检测Gli1及Runx2的表达,酶标法检测碱性磷酸酶( ALP)活性,茜素红染色法检测钙结节水平。结果:应用不同浓度的 Sr (0.1~5 mmol/L)处理BMSCs细胞7 d后,细胞内Gli1蛋白表达增高,Sr的浓度为3 mmol/L时,Gli1表达达到高峰;使用Cy与Sr共处理BMSCs 7 d,能拮抗Sr对Gli1蛋白表达的上调作用;应用Gli1-siRNA转染细胞后,能下调Gli1蛋白的表达,并抑制Sr对Gli1下游Runx2蛋白表达的上调作用,还可拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论:Hedgehog/Gli1通路参与了Sr促进骨髓间充质干细胞向成骨分化的过程。
雷奈酸锶、骨髓间充质干细胞、Hedgehog蛋白、Gli1蛋白、Runx2蛋白
R363.2+1(病理学)
广东省自然科学基金资助项目No.S2012010009403;广东省科技计划No.2011B031800002;广州市科技计划2012J4300082
2015-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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