NOD8对H2O2诱导的人肝细胞凋亡的影响

摘要：

目的:探讨NOD8对H2O2诱导的人肝细胞L02凋亡的影响.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重组质粒经JetPRIME介导转染L02细胞;用H2O2诱导细胞凋亡.实验分为pEGFP-C2组、pEGFP-C2+ H2O2组和pEGFP-NOD8+ H2O2组.采用MTT法检测细胞活性,Western blotting检测细胞NOD8的蛋白表达,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法检测细胞caspase-3活性.结果:通过MTT检测不同浓度(0.2～2 mmol/L)H2O2刺激6h后的细胞活性,确定1mmol/L H2O2为诱导细胞凋亡的剂量.Western blotting检测结果显示,转染pEGFP-NOD8质粒的细胞NOD8蛋白表达明显增加.Hoechst 33342染色法观察发现,pEGFP-C2+ H2 O2组有较多细胞出现强蓝色荧光细胞核,细胞凋亡较多,而pEGFP-NOD8+ H2O2组细胞凋亡明显减少.流式细胞术分析显示,pEGFP-C2+ H2O2组的细胞凋亡率明显升高,pEGFP-NOD8+ H2O2组的细胞凋亡率则显著下降.pEGFP-C2+ H2O2组细胞的caspase-3活性明显升高,而pEGFP-NOD8+ H2O2组细胞的caspase-3活性显著下降.结论:NOD8可抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡,其作用机制可能与NOD8抑制细胞的caspase-3活性有关.

关键词：L02细胞、过氧化氢、NOD8、半胱氨酸蛋白酶-3

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分类号：R363(病理学)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目S2012010008161;暨南大学“211工程”三期预研项目

在线出版日期：2015-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2033-2037